雏鹅感染小鹅瘟的诊断

小鹅瘟（Gosling plague ，GP）是由小鹅瘟病毒或称鹅细小病毒（Goose Plague virus 或Goose Parvovirus ，GPV） 引起的主要侵害３０ 日龄以内雏鹅和雏番鸭的一种急性接触性传染病。该病以急性肠炎及肝、肾、心实质脏器败血性病变为特征，具有较强的传染性和较高的死亡率，是危害和威胁养鹅业最重要的传染病之一。２０１３ 年３ 月，贵州省某肉鹅饲养场的５ 日龄雏鹅患病，经临床诊断、病理剖检、实验室诊断，确诊为小鹅瘟。

１ 　发病情况

　２０１３ 年３ 月，贵州省某肉鹅饲养场引进３００ 羽雏鹅，３ 日龄雏鹅发病，表现为精神委顿，离群独偶，鼻孔流出浆液性鼻液，患鹅频频摇头，拉灰黄色或黄绿色稀粪，神经紊乱。至５ 日龄，共死亡雏鹅５８ 羽。

２ 　流行特点

小鹅瘟在自然条件下仅感染雏鹅，潜伏期３ ～４ d ，发病后数日内波及全群，死亡率最高可达１００％ 。最早１ ～ ４ 日龄开始发病，随着日龄的增长易感性下降，２０ 日龄以上很少发病。本病通过污染的饲料、饮水、用具和环境经消化道传播，也可经污染的种蛋垂直传播。

３ 　临床症状

临床症状可分为最急性型、急性型和亚急性型。最急性型通常发生在１ 周龄内的雏鹅，常无临床症状突然死亡，或发现精神委顿后数小时死亡，此型传播迅速，数小时内波及全群，致死率高达９５％ ～ １００％ 。急性型病鹅离群站立，不饮不食，临死前出现神经症状，颈部扭转，两腿麻痹，全身抽搐。亚急性型多发生于流行后期孵化出的雏鹅或１５ 日龄以上的雏鹅，表现为不愿走动、减食或不食、腹泻，症状较轻，病程也较长。

４ 　剖检变化

病死鹅腺胃肿胀、嗉囊肿大，心外膜出血、心耳充血，肝脏暗黄，肠道栓塞 。

５ 　实验室诊断
５ ．１ 　病料采集
　　无菌采集刚病死鹅的肝脏置冰瓶中，立即送实验室进行诊断。

５ ．２ 　分子生物学鉴定

５ ．２ ．１ 　主要试剂：Taq DNA 聚合酶购自TaKaRa 公司，SDS 、蛋白酶K 、dNTPs 、GoldView I 型核酸染色剂、DL２０００ 、Tris 、EDTA 等均购自天根生化科技（北京）有限公司，苯酚、氯仿、无水乙醇等为国产试剂。

５ ．２ ．２ 　模板的制备：取病变典型的雏鹅肝脏材料，按１ ∶ ５ 的比例加入生理盐水研磨成组织匀浆，１０ ０００ r／min 离心１０ min ，取上清液按SDS － 蛋白酶K 法提取病料的DNA 。

５ ．２ ．３ 　PCR 扩增：根据GenBank 中的小鹅瘟病毒VP３ 基因，应用DNAStar 软件，设计１ 对引物用于扩增小鹅瘟病毒VP３ 基因片段，目的基因扩增片段长度为５３６ bp 。