小鹅瘟与巴氏杆菌病混合感染的诊治

小鹅瘟病毒属于细小病毒科、细小病毒属、鹅细小病毒。本病毒对雏鹅、仔鹅有特异性致病作用，而对鸭、鸡、鸽等家禽类及哺乳类动物无致病性。本病主要侵害4～20日龄的雏鹅，20日龄以内的小鹅免疫功能不全，尤其以7～10日龄时发病率和死亡率最高，发病日龄越小死亡越多；不同地区、目龄、免疫状况的鹅群，其发病率与死亡率各不一致。

鹅巴氏杆菌病是由多杀性巴氏杆菌引起的一种急性败血性传染病，危害十分严重，鸡、鸭、鹅都易感染，所以又称禽霍乱。本病的传染途径一般是经消化道和呼吸道，消化道传染是通过摄食和饮水。

l 病例介绍
1．1 病例来源
来自金湖县畜牧兽医站临诊病例。
1．2 试验器材

剪刀、镊子、刀片、载玻片、盖玻片、光学显微镜、注射器及针头、酒精棉球、接种环、平皿、酒精灯、恒温箱、离心机、蛋架、12日龄非免疫鹅胚(由金湖县畜牧兽医站实验室提供)。

1．3 试剂

美蓝染液、青霉素、链霉素、灭菌的生理盐水、鲜血琼脂平板、麦康凯培养基、抗小鹅瘟血清、沙堡氏培养基(蛋白胨 10 g、琼脂2O g、麦芽糖4O g、蒸馏水1 000 ml，加热融化，调整pH 至5．4，过滤，分装试管，高压灭菌20 rain，做成斜面)

2 病史及流行病学调查

2009年8月，金湖县农牧公司一个体养殖户司某购人 3 000羽鹅苗，1～3日龄时未进行小鹅瘟疫苗免疫接种，至 15日龄时，个别雏鹅开始腹泻，用氟哌酸饮水治疗6 d，又用黄芪多糖饮水治疗6 d，均未取得效果，发病率增至80以上，病死率达28 。

3 临床症状

病鹅精神委顿，嗜睡；拒食，饮水量大；排出白色或绿色稀粪；鼻端有浆液性分泌物，呼吸困难；脚麻痹，起立和行动困难；消瘦。

4 剖检病变

剖检20羽病死雏鹅，心外膜、心冠脂肪有出血；肝脏稍肿、质脆、黄棕色，肝表面散布许多有针尖大的灰白色坏死灶；个别鹅鼻腔内有浆液性渗出物和干酪样坏死；空肠与回肠卡他性纤维素性坏死，靠近卵黄与盲肠的肠段，外观极度膨大，切开肠壁，肠腔内充塞着一种淡灰白色或灰黄色干燥、凝固的栓子，外面包着一层厚的灰白色假膜，中心为黑褐色或绿色干燥的肠内容物，盲肠与泄殖腔黏膜坏死脱落。

5 实验室诊断
5．1 病毒分离

无菌采集病鹅的脾、肝病料，加灭菌生理盐水制成1：1O 悬液，取上清液，加入双抗，置4 ℃ 冰箱存放12 h， 3 000 r／min离心15 min，取上清液2 ml接种于12～15日龄鹅胚。初次分离或一直于鹅胚中传代的病毒，需经若干代繁殖，待其适应鹅胚后才有致病性。鹅胚尿囊腔接种后5～7 d 死亡，胚体广泛出血，尤以翅尖、趾、胸部、颈及喙旁更为明显，死胚肝有变性和坏死，绒毛尿囊膜有轻度水肿，心肌变性呈瓷白色。

5．2 动物试验

将15羽3日龄雏鹅随机分成3组，每组5羽，隔离饲养。第1组雏鹅皮下注射生理盐水1 ml／羽；第2组无菌采集病雏脑、脾、肝，制成1：5组织悬液，加青霉素、链霉素后，离心，皮下注射上清液0．5 ml／羽；第3组将上述病料匀浆 0．5 ml与小鹅瘟高免血清1 ml混合作用，10 rain后皮下注射。3 d后，第2组开始发病并全部死亡，第1、3组雏鹅未出现发病死亡。经鹅胚尿囊接种实验和雏鹅回归实验可初步诊断为小鹅瘟病毒。

5．3 细菌分离及初步鉴定

5．3．1 染色镜检：采集发病雏鹅新鲜病料(心血、肝、脾等组织)，涂片，分别做革兰氏和瑞氏染色，置油镜下观察，瑞氏染色可见一定数量的两极浓染的短杆菌，革兰氏染色为阴性。

5．3．2 细菌分离：取病死鹅的肝、脾组织，分别接种于鲜血琼脂平板培养基、麦康凯琼脂平板培养基、肉汤培养基，置 37℃温箱中培养24 h后观察。结果在鲜血琼脂培养基上可见中等大小的淡灰白色、圆形、湿润、露珠样小菌落，菌落周围不溶血；在麦康凯培养基上未见细菌生长；在肉汤培养基中开始出现轻度混浊，4～6 d后液体变成澄清，管底有黏稠沉积物，振荡不分散，表面有灰白色菌环。取培养物涂片、革兰氏染色、镜检，可见两端钝圆、两极浓染的卵圆形小杆菌。

5．3．3 生化革兰氏阴性试验：结果为不液化明胶，产生硫化氢和氨，48 h内可分解葡萄糖、果糖、蔗糖、甘露糖和单奶糖，产酸不产气，不发酵乳糖、山梨醇、鼠李糖和菊糖；MR、VR 试验为阴性，靛基质阳性，过氧化氢酶和氧化酶均为阳性。

5．3．4 药敏试验：按常规纸片法对分离菌进行药敏试验，该菌对青霉素、链霉素、土霉素、氯霉素、林可霉素敏感。

6 诊断

通过流行病学、临床症状、剖检变化及实验室诊断结果，综合分析、判断，可确诊为亚急性小鹅瘟，同时感染巴氏杆菌。

7 防治措施

将病死鹅全部深埋，圈舍及饮水器、食槽彻底消毒。全群紧急注射小鹅瘟高免血清1 ml／羽，用氟苯尼考按 150 mg／kg体重全群饮水1次／d，连用3 d；林可霉素、壮观霉素按4～8 mg／kg体重肌肉注射，1次／d，连用3 d。经投药后第2 d即停止死亡，3 d后病鹅全部康复。

8 小结

病鹅剖检时肠管呈现出如香肠状病变，这种变化多在亚急性小鹅瘟时出现。再结合发病时间为15日龄雏鹅，故确定是亚急性小鹅瘟。

该群鹅在出壳时未注射小鹅瘟血清，鹅舍所在环境养鹅密度大，周围鹅舍时有小鹅瘟发生，致使该群鹅在15日龄时感染小鹅瘟。

巴氏杆菌是环境常在菌，鹅舍污染严重、消毒不严格、饲养密度高、潮湿、通风不良，雏鹅群抗病力差、体质虚弱、遇到天气突变或其它应激因素而发病。应杜绝从疫区引进雏鹅。雏鹅出壳后肌肉注射小鹅瘟血清，能很好地预防该病。